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BSA ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介

BSA ELISA檢測試劑盒應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術測定樣品中BSA的殘留量,柏萊源生物代理Hillgene公司產(chǎn)品,請咨詢我們貨期準確產(chǎn)品信息及報價!

產(chǎn)品型號:HG-BS001
更新時間:2025-03-27
訪問量:59
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    BSA ELISA 檢測試劑盒說明書

貨號: HG-BS001

BSA ELISA檢測試劑盒


產(chǎn)品簡介:

BSA ELISA檢測試劑盒用于檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中BSA的殘留含量。 

本試劑盒應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術測定樣品中BSA的殘留量。用捕獲抗體包被96孔酶標板,制成固相抗體,隨后加入標準品和檢測樣品,再加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的標記抗體,形成一個固相抗體-BSA-酶標抗體的三明治結(jié)合物,反應結(jié)束后洗滌,然后加入底物進行顯色反應,底物在HRP的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在終止液的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算待測樣品中BSA的含量。

規(guī)格:

96 T

應用:

適用于生物制品純化工藝過程的優(yōu)化、中間工藝過程的雜質(zhì)控制以及終產(chǎn)品的放行檢測

產(chǎn)品組成:

組分規(guī)格配制
BSA Coated Plate(包被酶標板 )8×12條即用型
BSA Standard(標準品 ) 100μL×1管(5μg/mL)按建議稀釋方式操作
1250×Anti-BSA(1250× 酶標抗體) 30μL×1管按建議稀釋方式操作
20× Buffer(20× 緩沖液)30mL×1瓶按建議稀釋方式操作
Color Reagent A(顯色液 A) 8mL×1 瓶即用型
Color Reagent B(顯色液 B) 8mL×1 瓶即用型
Stop Solution(終止液 )15mL×1 瓶即用型
封板膜5張即用型
說明1份/


產(chǎn)品儲存條件與有限期:

未開封的試劑盒, 2-8℃條件下有效期為12個月。

本試驗所需自備試驗器材:

1. 酶標儀、酶標板恒溫振蕩器或恒溫培養(yǎng)箱、洗板機(不與其他項目交叉使用)。 

2. 高精度移液器及一次性吸頭(0.5-10µL、 10-100µL、 30-300µL、 100-1000µL)。 

3. 去離子水、吸水紙、 EP管

試劑準備:

1.實驗室內(nèi)盡量不放置電子天平或不稱量BSA粉末,實驗前清潔實驗臺面。

2. 1×Buffer 配制:取Buffer (20×) 1份,加19份去離子水配制成工作濃度Buffer (1×)。 Buffer (20×)中如果有結(jié)晶形成,應置于室溫或37℃水浴輕輕搖晃,待結(jié)晶完i全溶解后再進行稀釋。未用完的Buffer (20×)應置于2-8℃儲存。

注:按需進行配制,使用潔凈的專用容器,不與其他項目共用的溶液、容器及耗材。
BSA ELISA檢測試劑盒

3. 標準品的配制:用1×Buffer將標準品稀釋至50ng/mL,然后用2倍倍比稀釋的方法配制標準品,如上圖: 

4.1× 酶標抗體配制:冰箱中取出1250×酶標抗體放于冰盒上,根據(jù)實驗用量(100μL/孔),用1×Buffer將1250×酶標抗體稀釋1250倍即為1×酶標抗體。 1250×酶標抗體不要長時間處于室溫下,最好是用時拿出,并在冰盒上操作; 1×酶標抗體需現(xiàn)配現(xiàn)用。 

5. 底物液的配制:使用前i10分鐘將顯色液A、顯色液B等體積混合,避光。確保底物液不被污染,如混合后的底物液已經(jīng)變藍,請勿使用。

實驗流程:

1. 將試劑盒各組分恢復室溫(18~25℃)30min,從已平衡至室溫的鋁箔袋中取出試驗所需板條,用記號筆標記板條順序,剩余板條用封板膜封板后重新放回鋁箔袋中,封好,置于2-8℃保存。
2. 樣品溫育:設置標準品孔、空白孔和樣本孔,標準品孔按順序加入不同濃度的標準品,空白孔加入1×Buffer,樣本孔中加入待測樣本,加入量均為100µL/孔(建議做復孔,防止跳孔出現(xiàn)), 用封板膜封板,然后37℃靜置溫育1h。
3. 洗板:棄去孔中液體,用1×Buffer洗板3次(300µL/孔),在吸水紙上拍干孔中的殘留液體。(如采用手洗板,應注意加1×Buffer洗板時需要懸空加液,槍頭最好不要碰到孔內(nèi)壁;每次加入Buffer后,靜置1min并輕微震蕩;拍干時注意每次換新的吸水紙或在紙上干凈的區(qū)域拍干)
4. 酶標抗體溫育:按100µL/孔加入1×酶標抗體, 封板膜封板, 37℃靜置溫育1h。
5. 洗板:同步驟3,其中洗板次數(shù)為5次。
6. 顯色:將預先配置好的底物液按100µL/孔加入酶標板中,用封板膜封板, 37℃避光靜置溫育20min。
7. 終止:按100µL/孔加入終止液。
8. 讀數(shù):在酶標儀中測定雙波長450/630nm處的OD值,測定應在終止后20min內(nèi)完成

結(jié)果處理:

以BSA標準品的OD值(OD450nm-OD630nm)為因變量Y,以標準品濃度(ng/mL)為自變量X繪制標準曲線,推薦使用四參數(shù)Logisitic 數(shù)學模型擬合方程: Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D。將樣品OD值(OD450nm-OD630nm)代入標準曲線方程式,計算樣品中BSA的含量。

標準曲線:

BSA ELISA檢測試劑盒

實驗檢測結(jié)果:


標準品濃度(ng/mL)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
501.7751.8031.789
251.0910.9951.043
12.50.5710.5910.581
6.250.3240.3080.316
3.1250.1930.1790.186
1.560.1320.127 0.130
00.0720.0880.080


 

注意事項:

1. 測定BSA含量的容器應專用,防止實驗室中BSA污染。 

2. 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。 

3. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用,試劑盒各組分使用前應充分混勻。 

4. 嚴格遵守說明書的操作方法,必須使用本試劑盒配套的試劑,不可使用自制或其他試劑盒內(nèi)試劑,以保證準確的檢測效果。 

5. 注意在不同樣本和步驟間及時更換加樣槽和吸頭,避免交叉污染。

6.最終的試驗結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗環(huán)境密切相關。 

7.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。 

8.本試劑盒內(nèi)終止液為酸溶液,操作時應格外注意。 

9.所有生物樣本均具有潛在生物安全風險,使用者應嚴格按照當?shù)胤珊拖嚓P規(guī)定操作處理和丟棄樣本。

注意事項:


問題描述可能原因相應對策
標準曲線梯度差吸液或加液不準檢查移液器及吸頭
酶標板洗滌不完i全保證洗板次數(shù)及每孔的洗液用量
顯色很弱或無色溫育時間太短保證足夠的溫育時間
實驗溫度不正確使用推薦的溫育溫度
試劑體積不夠或漏加檢查吸液及加液過程,保證所有試劑按順序足量添加
OD值讀數(shù)低酶標儀設置不正確在酶標儀上檢查波長和濾光片裝置
讀數(shù)前應提前打開酶標儀進行預熱
變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況
酶標板底部有污染檢查酶標板底部是否有殘留的液體和手印
板孔內(nèi)有異物或氣泡加樣前確認板孔內(nèi)無異物,加樣后確認無氣泡
背景值高酶標板洗滌不完i全按說明書推薦的方法進行洗板
如果用自動洗板機,請檢查所有的加液口和排廢液口是否有堵塞
如果是手洗板,可適當增加洗板次數(shù)
洗液有污染配制新鮮洗液
靈敏度低試劑盒保存不當按說明書要求保存相關試劑

















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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢:

現(xiàn)貨供應:公司庫存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時間。

效期保障:嚴格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結(jié)果的可靠性。

專業(yè)技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優(yōu)化實驗條件,提高實驗成功率。

定制化服務:根據(jù)用戶需求,提供個性化的產(chǎn)品和服務解決方案。

售后保障:完善的售后服務體系,及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。

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