天天AV天天翘天天综合网,国产综合在线观看,97久久精品人人澡人人爽,熟妇人妻VA精品中文字幕

歡迎進(jìn)入柏萊源(天津)生物科技有限公司網(wǎng)站!
13302035784
產(chǎn)品中心

Product Center

當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  生物試劑  -  試劑盒kit  -  HG-KF001K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒

K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

基因編輯的 K562 細(xì)胞因其良好的促進(jìn)增殖作用而被廣泛研究和使用,盡管 K562 細(xì)胞經(jīng)過輻照處理,但仍需確保細(xì)胞終產(chǎn)品中盡可能沒有滋養(yǎng)細(xì)胞殘留,K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒使用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)檢測(cè)法,設(shè)計(jì)特異性的靶標(biāo)位點(diǎn),進(jìn)行K562 feeder cell 殘留檢測(cè)。柏萊源生物為譜新生物代理商,具體產(chǎn)品價(jià)格與技術(shù)問題等信息咨詢,請(qǐng)聯(lián)系我們!

產(chǎn)品型號(hào):HG-KF001
更新時(shí)間:2025-04-01
訪問量:36
詳細(xì)介紹在線留言

    K562 feeder cell  殘留檢測(cè)試劑盒說明書


貨號(hào): HG-KF001

K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒


產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

基因編輯的K562 細(xì)胞因其良好的促進(jìn)增殖作用而被廣泛研究和使用。研究表明使用基因編輯的K562 細(xì)胞作為滋養(yǎng)細(xì)胞能使NK細(xì)胞的擴(kuò)增效率提高幾十到上萬(wàn)倍。在最近的FDA發(fā)布的指南文件《Considerations for the Use of Human- and AnimalDerived Materials in the Manufacture of Cellular and Gene Therapy and Tissue-Engineered Medical Products》和藥監(jiān)局發(fā)布的《淺析細(xì)胞治療產(chǎn)品中滋養(yǎng)細(xì)胞的使用及控制策略》指南文件中,均提及可以使用經(jīng)過輻照后的K562細(xì)胞作為滋養(yǎng)細(xì)胞,用于體外培養(yǎng)使用。
盡管K562細(xì)胞經(jīng)過輻照處理,且易被生長(zhǎng)的NK 細(xì)胞殺死,但仍需確保細(xì)胞終產(chǎn)品中盡可能沒有滋養(yǎng)細(xì)胞殘留,以保障患者安全。建議研究人員開發(fā)靈敏度高的檢測(cè)方法,例如反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)檢測(cè)法、微滴式數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng)(ddPCR)檢測(cè)法等,并對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行專屬性、準(zhǔn)確性、精密度、檢測(cè)限等驗(yàn)證,以保證檢測(cè)方法能對(duì)生產(chǎn)過程及終產(chǎn)品進(jìn)行有效表征,減少對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量、臨床療效及安全性的影響。
本試劑盒使用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)檢測(cè)法,設(shè)計(jì)特異性的靶標(biāo)位點(diǎn),進(jìn)行K562 feeder cell 殘留檢測(cè)。
本試劑盒的檢測(cè)范圍:10 copies/μL~ 1×106 copies/μL,K562細(xì)胞的最i低檢測(cè)限度為0.05%。

應(yīng)用:

細(xì)胞制劑樣本中K562 feeder cell殘留檢測(cè)。

規(guī)格:

100 Reactions

產(chǎn)品組成:

組分規(guī)格配制
K562檢測(cè)定量標(biāo)準(zhǔn)品(1×108copies/μL)50μL x1管-18℃及以下
K652 Primer&Probe MIX550μL x1管-18℃及以下,避光
2×qPCR Reaction Buffer1.2mL x1管-18℃及以下,避光
DNA稀釋液1.5 mL x3管-18℃及以下
無酶水1.0 mL x1管18℃及以下
50x ROX High50μL x1管-18℃及以下,避光
50x ROX Low50μL x1管-18℃及以下,避光


存儲(chǔ)條件及有效期

-18℃及以下儲(chǔ)存,有效期 18 個(gè)月

適用機(jī)型(包括但不限于)

◆?ABI PRISM 7500 

 ◆?FQD-96A(博日) 

 ◆?CFX96(Bio-Rad) 

 ◆?Roche Light Cycler 480

儀器

ROX參比染料

ABI5700,7000,7300,7700,7900HT Fast,StepOne,StepOne Plus

ROX High

ABI 7500,7500 Fast,ViiA7,QuantStudio 3 and 5,QuantStudio 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P,MX3005P,MX4000P

ROX Low

  Bio-Rad CFX96,CFX384,iCycler iQ,iQ5,MyiQ,MiniOpticon,Opticon,
Opticon 2,Chromo4.Roche Applied Science LightCycler 480,LightCycler
2.0;Lightcycler 96.Eppendorf Mastercycler ep realplex,realplex2s
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q,Rotor-Gene 3000,Rotor-Gene 6000.
Thermo Scientific PikoReal Cycler.Cepheid SmartCycler.Illumina Eco qPCR

No ROX


需自行準(zhǔn)備的材料

(1) 熒光定量PCR儀器(包括FAM和VIC熒光通道)

(2) 渦旋振蕩器

(3) 掌上離心機(jī)

(4) RNA 提取試劑     

(5) 逆轉(zhuǎn)錄檢測(cè)試劑

(6) 移液器及吸頭     

(7) 八聯(lián)排管加蓋或96孔半裙邊板加封口膜

實(shí)驗(yàn)步驟

1.?RNA 提取

取一定量的細(xì)胞懸液(1E6-5E6細(xì)胞)進(jìn)行RNA提取

2.?逆轉(zhuǎn)錄

對(duì)提取的細(xì)胞RNA進(jìn)行基因組DNA去除和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),獲得檢測(cè)使用的cDNA。

3.?PCR 擴(kuò)增

3.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制:

取出定量標(biāo)準(zhǔn)品和DNA稀釋液,置于4℃冰箱中融化;待融化完i全后,上下顛倒混勻20次后,在復(fù)合轉(zhuǎn)子離心機(jī)中6000 rpm 離心5秒,用DNA 稀釋液將RNA定量標(biāo)準(zhǔn)品(1E+08 copies/μL)梯度稀釋至1E+06 copies/μL、1E+05 copies/μL、1E+04 copies/μL、1E+03 copies/μL,1E+02 copies/μL,10 copies/μL。具體操作如下:取 7 支 1.5 mL 離心管,分別標(biāo)記為STD0,STD1,STD2,STD3,STD4,STD5,STD6,參考下表進(jìn)行稀釋操作(每一步稀釋都需充分震蕩混勻):

標(biāo)準(zhǔn)品代號(hào)稀釋體積標(biāo)準(zhǔn)品終濃度(copies/μL)
STD010μL標(biāo)準(zhǔn)品+90μL DNA稀釋液1E+07
STD110μLSTD0+90μL DNA稀釋液1E+06
STD210μLSTD1+90μL DNA稀釋液1E+05
STD310μLSTD2+90μL DNA稀釋液1E+04
STD410μLSTD3+90μL DNA稀釋液1E+03
STD510μLSTD4+90μL DNA稀釋液1E+02
STD610μLSTD5+90μL DNA稀釋液1E+01





3.2 PCR反應(yīng)液配置
根據(jù)樣本檢測(cè)數(shù)量計(jì)算需要的反應(yīng)孔數(shù),每個(gè)樣本進(jìn)行3次重復(fù)檢測(cè)。備注:根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次所需的Mix混合液總量:Mix混合液 =(反應(yīng)孔數(shù)+2)× 15 μL(含有2孔的損失量)。在生物安全柜內(nèi)配制PCR混合液,配置情況如表所示:

組分單個(gè)反應(yīng)量(μL)
2×qPCR Reaction MIX10
K562 Primer&Probe MIX4.6
50x ROX0.4


備注:如果儀器不需要加ROX,可以將50x ROX 替換為無酶水。
各個(gè)反應(yīng)孔加樣情況如表所示:


類型體積
標(biāo)準(zhǔn)曲線15 μL PCR反應(yīng)MIX+5 μL(STD1/STD2/STD3/STD4/STD5/STD6)
空白對(duì)照15 μL PCR反應(yīng)MIX+5 μL DNA稀釋液
供試品15 μL PCR反應(yīng)MIX+5 μL供試品/加標(biāo)樣本RNA提取液



3.3 加完樣后,將8聯(lián)排蓋子蓋上,先蓋上兩頭的蓋子,再蓋上中間的蓋子,并在蓋子邊 緣做好標(biāo)記。
3.4 加樣完成密封好管子后,先在復(fù)合轉(zhuǎn)子離心機(jī)中6000 rpm離心10秒將管壁的液體離心收集至管底,再置于調(diào)節(jié)至6檔的旋渦混合器上震蕩10秒以上,完i全混勻反應(yīng)液,再在復(fù)合轉(zhuǎn)子離心機(jī)中6000 rpm離心
10秒將管壁的液體離心收集至管底,如有氣泡,需將氣泡排盡。
3.5 PCR程序設(shè)置
打開PCR儀,設(shè)置PCR反應(yīng)程序:







類型溫度時(shí)間循環(huán)數(shù)備注
預(yù)變性95℃3分鐘NA
變性95℃15秒45 NA
退火&延伸60℃60秒熒光信號(hào)采集




3.6 設(shè)置樣品反應(yīng)板:按照PCR反應(yīng)液加樣位置編輯標(biāo)準(zhǔn)品、NTC、Neg、ERC、待測(cè)樣本的信息。在反應(yīng)板圖表中,選擇樣品孔,在Sample Type中下拉選擇Unknow,勾選熒光FAM,Target Name命名為K562,勾選熒光VIC,Target Name命名ABL,輸入每個(gè)樣品的重復(fù)次數(shù)及Sample Name。輸入每個(gè)稀釋梯度的重復(fù)次數(shù)及Sample Name。并且分別在STD1,STD2,STD3,STD4,STD5,STD6的Concentration一欄賦值為1E+06、1E+05、1E+04、1E+03、1E+02、1E+01,選擇單位(copies/μL)。
3.7 開啟加熱蓋,按照樣品板編輯信息放置八聯(lián)管,關(guān)閉加熱蓋,啟動(dòng)PCR運(yùn)行程序,開始PCR反應(yīng)。

4.?數(shù)據(jù)處理

4.1 反應(yīng)結(jié)束后,儀器會(huì)自動(dòng)設(shè)置基線和閾值。保存并導(dǎo)出結(jié)果。
4.2 利用excel計(jì)算結(jié)果:將儀器直接導(dǎo)出的檢測(cè)結(jié)果帶入預(yù)先設(shè)計(jì)好的檢測(cè)結(jié)果分析表格中,進(jìn)行最終的檢測(cè)結(jié)果計(jì)算,并將計(jì)算的excel表格附件到檢測(cè)記錄中。
4.3 計(jì)算公式K562 feeder cell 殘留比例 =K562 檢測(cè)結(jié)果/ABL 檢測(cè)結(jié)果*100%

5.?系統(tǒng)適用性判定

5.1 三個(gè)平行孔間的Ct值變異系數(shù)CV%≤5%,Ct值大于35的孔除外。
5.2 空白 NTC 應(yīng)無Ct值或大于標(biāo)準(zhǔn)曲線最i低濃度2個(gè)Ct值。
5.3 PCR 反應(yīng)擴(kuò)增效率Effective:85.0%~110.0%,R2≥0.990。

6.?符號(hào)及縮寫

6.1 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard Products):STD;
6.2 無模板對(duì)照:NTC;
6.3 供試品(Sample):S。

注意事項(xiàng)

1. 本試劑盒已通過穩(wěn)定性(凍融等因素)的驗(yàn)證,無需分裝。
2. 陰性樣品和陽(yáng)性樣品(參考品和待測(cè)樣品等)的配制環(huán)境需區(qū)分區(qū)域,不可在一個(gè)區(qū)域內(nèi)操作,配制人員需穿戴整齊,戴 好口罩、手套和穿好潔凈服。
3. 注意在不同加樣步驟間及時(shí)更換吸頭,避免交叉污染,避免長(zhǎng)時(shí)開蓋。
4. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用。
5. 試劑盒內(nèi)所有組分建議在低溫環(huán)境融化后使用。
6. 只有嚴(yán)格遵守說明書的操作方法,全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證最佳檢測(cè)效果。
7. 盡量在當(dāng)天完成樣本前處理純化后立即進(jìn)行后續(xù) qPCR 檢測(cè),以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
8. 最終的試驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。
9. 公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量, 預(yù)留充足的樣本。
10. 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。


K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品訂購(gòu),請(qǐng)聯(lián)系柏萊源(天津)生物科技有限公司!

柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢(shì):

現(xiàn)貨供應(yīng):公司庫(kù)存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時(shí)間。

效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

專業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),幫助用戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)成功率。

定制化服務(wù):根據(jù)用戶需求,提供個(gè)性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案。

售后保障:完善的售后服務(wù)體系,及時(shí)解決用戶在使用過程中遇到的問題。

K562 feeder cell 殘留檢測(cè)試劑盒:柏萊源(天津)生物科技有限公司,更多產(chǎn)品資訊,請(qǐng)聯(lián)系我們哦!










在線留言

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
2473262194

TEL:13302035784

微信咨詢

美国色情巜肉欲横流| 电击惩罚花蒂榨乳调教小说| 福彩3d字谜图谜总汇| 天天躁日日躁狠狠躁AV中文| 男生自慰出精gay2022| 天美传媒av妇女干部| 处破痛哭A√18成年片免费| 野外真人实战cs| 凸凹人妻人人澡人人添| 亚洲日韩精品一区二区三区无码| 国产老师色诱我好爽在线观看 | 麻豆国产VA免费精品高清在线 | 亚洲AV无码一区二区二三区∝ | 新金瓶悔1一5集免费大片| 国产日产久久高清欧美一区| 夜夜高潮次次欢爽av女视频| 色噜噜狠狠狠综合曰曰曰 | 国产偷抇久久精品a片蜜臀a| 免费观看a级毛片| 熟妇人妻AV无码一区二区三区| 麻花豆传媒剧国产mv的特点| 噜噜噜亚洲色成人网站| 日本熟妇色XXXXX日本免费看| 国产精品99久久久久久| 无码精品一区二区三区| 国产精品久久久久一区二区三区| 黑人巨大进入黑人孕妇| 性色AV无码久久一区二区三区| 妺妺窝人体色www在线小说| 日本丰满熟妇XXXXXHD| 在c用力把桌腿a抬离地面时小说| 日日碰狠狠添天天爽超碰97| 欧美成人a猛片在线播放| 无码熟妇人妻AV在线网站| 亚洲 国产 日韩 在线 一区| 性做久久久久久久久| 宝贝胸罩脱了让我揉你的胸| 色综合色狠狠天天综合色| 国产农村熟妇videos| 欧美丰满熟妇BBBBBB百度| 特黄aaaaaaa片免费视频|