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TECHNICAL ARTICLES
在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，對(duì)細(xì)胞活力的準(zhǔn)確評(píng)估是至關(guān)重要的。細(xì)胞活力是衡量細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和功能的關(guān)鍵指標(biāo)，對(duì)于藥物篩選、疾病模型構(gòu)建以及再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域具有重要意義。在眾多的細(xì)胞活力評(píng)估方法中，CCK-8（CellCountingKit-8）試劑盒因其簡(jiǎn)便、靈敏和可靠的特性而受到廣泛應(yīng)用。CCK-8試劑盒基于WST-8[4-(乙基偶氮)-鄰苯二酚]的原理，能夠在活細(xì)胞中代謝生成具有顏色的產(chǎn)物，該產(chǎn)物在一定波長(zhǎng)下具有光吸收值。隨著細(xì)胞活力的增加，代謝產(chǎn)物量也隨之增加，因此可以通過(guò)測(cè)...
在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)是評(píng)估藥物、化學(xué)物質(zhì)或生物因子對(duì)細(xì)胞影響的重要手段。CCK-8試劑盒作為一種常用的細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)工具，因其簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高的特點(diǎn)，成為了科研人員的理想選擇。CCK-8試劑盒利用了WST-8[又稱CCK-8(CellCountingKit-8)]這一水溶性四唑鹽，能夠在活細(xì)胞中進(jìn)行代謝，從而產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。這種試劑盒通過(guò)測(cè)量水溶液中存在的電子受體數(shù)量來(lái)量化細(xì)胞活性。當(dāng)細(xì)胞增殖時(shí)，水溶液中的電子受體數(shù)量會(huì)增加，從而可以直觀地反映...
Lipo2000試劑的使用范圍較廣，它不僅可以用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染、siRNA表達(dá)載體、雙鏈核糖核酸dsRNA轉(zhuǎn)染,以及RNA等核酸轉(zhuǎn)染，還可以用于文庫(kù)篩選的高通量轉(zhuǎn)染。對(duì)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染Lipo2000幾乎涵蓋了HEK293、CHO細(xì)胞、HeLa等190多種細(xì)胞系。本期內(nèi)容一起來(lái)學(xué)習(xí)下Lipofectamine™2000瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)流程吧！(一)細(xì)胞轉(zhuǎn)染前的準(zhǔn)備:因轉(zhuǎn)染效率依賴于細(xì)胞培養(yǎng)密度，而Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑具有細(xì)胞毒性，使用時(shí)需確保高細(xì)胞密度進(jìn)行，建...
ATCC（AmericanTypeCultureCollection）提供了廣泛的細(xì)胞和菌株供科研和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域使用。為了確保細(xì)胞或菌株的長(zhǎng)期保存和穩(wěn)定性，以下是一些常見的方法來(lái)保存ATCC細(xì)胞或菌株：凍存保存：凍存是常用的細(xì)胞或菌株保存方法之一。將細(xì)胞或菌株分裝到含有適當(dāng)濃度的保護(hù)劑（例如DMSO或甘油）的凍存液中，然后快速冷凍至低溫（通常為-80°C或液氮中的-196°C）。這種方法可以有效地防止細(xì)胞或菌株的代謝活動(dòng)，延長(zhǎng)其保存時(shí)間。1.常規(guī)培養(yǎng)保存：某些細(xì)胞或菌株可以通過(guò)定...
重組蛋白是利用基因工程技術(shù)，將目標(biāo)蛋白的編碼序列克隆到載體中，然后在細(xì)胞中進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)操作，最終得到具有生物活性的蛋白質(zhì)。重組蛋白在生物學(xué)研究中有很廣泛的應(yīng)用，比如制備抗體、進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)、藥物研究、免疫實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)以及晶體結(jié)構(gòu)分析等。對(duì)于生物學(xué)研究來(lái)說(shuō)，重組蛋白的純化是非常重要的一步。純化重組蛋白的方法有很多種，下面介紹幾種常用的方法：親和層析法：利用目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體之間的特異性結(jié)合來(lái)分離目標(biāo)蛋白。通過(guò)調(diào)節(jié)條件，使目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體結(jié)合，而其他雜質(zhì)則從...
在生物醫(yī)學(xué)研究中，轉(zhuǎn)染技術(shù)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法，用于將外源性基因?qū)爰?xì)胞中，以研究基因功能、表達(dá)調(diào)控等重要問(wèn)題。而在這些實(shí)驗(yàn)中，轉(zhuǎn)染試劑的選擇和使用是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。其中，PEI（聚乙烯亞胺）線性轉(zhuǎn)染試劑以其高效、安全、易操作等優(yōu)點(diǎn)，得到了廣泛的應(yīng)用。PEI是一種高分子聚合物，具有優(yōu)異的細(xì)胞穿透性和基因轉(zhuǎn)染能力。其工作原理主要是通過(guò)與DNA或RNA形成復(fù)合物，保護(hù)它們免受細(xì)胞內(nèi)酶的降解，同時(shí)幫助其進(jìn)入細(xì)胞。PEI線性轉(zhuǎn)染試劑與其他轉(zhuǎn)染試劑相比，具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性，因...
在生物醫(yī)學(xué)研究中，轉(zhuǎn)染是一種重要的技術(shù)，用于將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)。而線性轉(zhuǎn)染試劑，以其高效、安全、易操作等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為了轉(zhuǎn)染研究中的熱門選擇。本文將重點(diǎn)介紹一種名為PEI（聚乙烯亞胺）的線性轉(zhuǎn)染試劑，探討其適用性及廣泛應(yīng)用。PEI是一種具有多個(gè)正電荷的聚合物，能與DNA形成絡(luò)合物，從而保護(hù)DNA免受細(xì)胞內(nèi)核酸酶的降解。此外，PEI還能通過(guò)形成納米顆粒，將DNA包裹在其中，增加其跨膜能力，從而提高轉(zhuǎn)染效率。這種轉(zhuǎn)染方法具有較高的細(xì)胞適用性，能適用于各種類型的細(xì)胞，包括原代細(xì)胞...
在基因轉(zhuǎn)染研究中，轉(zhuǎn)染試劑的作用非常重要。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是兩種常用的轉(zhuǎn)染方法，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)、原理和應(yīng)用方面有一些區(qū)別。下面將從不同的角度來(lái)比較這兩種轉(zhuǎn)染試劑，以便更好地理解它們之間的差異。結(jié)構(gòu)和組成--脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的主要成分是由磷脂和膽固醇等構(gòu)成的雙層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)使得脂質(zhì)體能夠在水相和脂相之間形成穩(wěn)定的界面，并包裹外源基因或RNA分子。--非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的結(jié)構(gòu)則多種多樣，可以是聚合物、蛋白質(zhì)或糖類等。這些轉(zhuǎn)染試劑不包含脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，而是通過(guò)其他機(jī)制實(shí)現(xiàn)基...
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